УДК:  576.8.093.1:615.371:582.951.4

Автор статьи:  Чистякова А.А.

Место работы автора:  Евразийский национальный университет им. Л.Н. Гумилева

Название журнала:  Биотехнология. Теория и практика

Год выпуска:  2010

Номер журнала:  4

Страницы:  с.35-43

Резюме на казахском языке:  Nicotiana tabacum өсiмдiк торшаcының цитозолiнде Omp16 Brucella abortus ерекшеленген, иммунделген белогiнiң транзиенттiк экспрессиясы жүзеге асырылды. Зерттеу нәтижесiнде Omp16бiртүтас иммуногендiк нуклеотидтiк тiзбегi бар өсiмдiк pO166121 ICON-векторы қүрастырылды, және ол Nicotiana tabacum жасушаларын агробактериялық инфильтрациялауға арналған.өсiмдiктердегi (>1% жиынтық белоктан) транзиенттiк экспрессияның мақсатты протеиннiң жоғары деңгейi оның негiзiнде вакциналық препараттарды әрi қарай әзiрлеу үшiн осы тәсiлдi пайдаланутиiмдiлiгi туралы бiзге қорытынды жасауға мүмкiндiк бердi.

Резюме на английском языке:  The process of transient expression, of immunogenic recombinant protein, Omp16 allocated from Brucella abortus, in cytozole of vegetative cage Nicotiana tabacum is carried out. During the research thevegetative express ionic ICON-vector – pO166121, containing nuclear sequence of target immunogenic protein Omp16, intended for agrobacterial infiltrations of Nicotiana tabacum protein, has been designed. A relatively high level of transient expression of a target protein in plants (>1% from total protein,) has allowed us to draw a conclusion about efficiency of application of the given technique for furtherelaboration of vaccine preparations on its basis.

Список литературы:  
1. Walmsley A., Arntzen C. Plants for delivery of edible vaccines // Current Opinion in Biotechnol. - 2000. - V. 11. - P. 126-129.
2. Tacket C., Mason H. A review of oral vaccination with transgenic vegetables // Microbes and Infection. - 1999. - V. 1. - P. 777-783.
3. T.A. Brown. Gentechnologie fur Einsteiger // Spektrum. Akademischer Verlag. Munchen. - 2007. - 5. Auflage.
4. Luo D., B. Ni, P. Li, W. Shi, S. Zhang, Y. Han, L. Mao, Y. He, Y. Wu and X. Wang // Protective Immunity Elicited by a Divalent DNA Vaccine Encoding Both the L7/L12 and Omp16 Genes of Brucella abortus in BALB/c Mice // Infect. Immun. - 2006 74(5): 2734-2741.
5. Ruf, S., M. Hermann, I.J. Berger, H. Carrer and R. Bock // Stable genetic transformation of tomato plastids and expression of a foreign protein in fruit // Nat Biotechnol. – 2001. 19(9): 870-5.
6. Marillonnet, S., С Thoeringer, R. Kandzia, V. Klimyuk and Y. Gleba //Systemic Agrobacterium tumefaciens-mediated transfection of viral replicons for efficient transient expression in plants // Nature Biotechnology. – 2005. - 23(6): 718-723.
7. Tang, X., Y. Nakata, H.-O. Li, M. Zhang, H. Gao, A. Fujita, O. Sakatsume, T. Ohta and K. Yokoyama // The optimization of preparations of competent cells for transformation of E.coli and A.tumefaciens // Nucl. Acids Res. - 1994. - 22(14): 2857-2858.
8. Hellens, R.P., A.C. Allan, E.N. Friel, K. Bolitho, K. Grafton, M.D. Templeton, S. Karunairetnam,A.P. Gleave and W.A. Laing //Transient expression vectors for functional genomics, quantification ofpromoter activity and RNA silencing in plants // Plant Methods. – 2005. - 1:13.
9. Birnboim, H.C. and J. Doly //A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinantplasmid DNA // Nucleic Acids Res. – 1979. - 7(6): 1513-23.

Электронный вариант:  скачать

---

Данная работа была проведена в лаборатории Молекулярной биологии и биотехнологии растенийДармштадского технологического университета (Германия), под непосредственным руководством моегонаучного консультанта профессора Дармштадского технологического университета, руководителялаборатории – Prof. Dr. Dr. ch. Heribert Warzecha.Осуществлен процесс транзиентной экспрессии рекомбинантного, иммуногенного белка Brucellaabortus Omp16, в цитозоле растительной клетки Nicotiana tabacum. В ходе исследования был сконструированрастительный экспрессионный ICON-вектор – pO166121, несущий нуклеотидную последовательность целевого иммуногенного белка Omp16, и предназначенный для агробактериальной инфильтрации клеток Nicotiana tabacum. Относительно высокий уровень транзиентной экспрессии целевого протеина в растениях(>1% от суммарного белка) позволил нам сделать вывод об эффективности применения данной методики длядальнейшей разработки на ее основе вакцинных препаратов.